[93]
Revista Ciencia Nor@ndina 5(1): 93 - 112 (2022) Artículo de revisión
e-ISSN: 2663-6360, p-ISSN: 2707-9848 doi: : 10.37518/2663-6360X2021v5n1p93
Obtención de mutantes con características biológicas clorofílicas en
Phaseolus vulgaris L. (Fabaceae)
Obtaining mutants with biological chlorophyll characteristics in
Phaseolus vulgaris L. (Fabaceae)
Andrei Cemionovich Ciminel
1
Petr Petrovich Andreyev
1
Héctor O. Chávez Angulo
2, *
1
Universidad Agraria Estatal de Moldavia. Comisia de admitere UASM Or. Chisinau, str. Mircesti, 42.
2
Universidad Nacional Autónoma de Chota. Ciudad Universitaria Colpamatara, 06120, Chota, Cajamarca, Perú.
* Autor de correspondencia [e-mail: hochaveza@unach.edu.pe]
RESUMEN
El objetivo en este estudio fue recopilar información del estado actual del conocimiento
de la obtención de mutantes de Phaseolus vulgaris L con características fisiológicas y
morfológicas importantes. Luego de una extensa búsqueda en la base de datos se
seleccionaron y revisaron 12 artículos de investigación que cumplieron con los criterios
científicos requeridos para ser considerados y aceptados en este trabajo. Los estudios
revisados demuestran que existe un limitado número de intervenciones sobre la obtención
de mutantes con características importantes en P. vulgaris L. Las mutaciones constituyen
un método de mejora genética; muchos países obtienen mutantes de semillas por
irradiación debido a que, si se aplica adecuadamente, cambia solo ciertos aspectos de los
caracteres genéticos de la planta, pese a que sus resultados esperados puedan ser lentos.
Palabras clave: inducción, mutagénesis.
ABSTRACT
The objective of the study was to collect information on the current state of knowledge of
obtaining mutants with fisiological and morphological important characteristics in
Phaseolus vulgaris L. After an extensive search in the database indexed to indexed journals,
12 investigations were selected and reviewed that met all the scientific criteria defined
inclusion criteria. The reviewed studies show that there is a limited number of interventions
on obtaining mutants with important characteristics in Phaseolus vulgaris L. and conclude
with the evidence that mutations constitute a method of genetic improvement; Many
countries obtain seed mutants by irradiation because, if applied properly, it changes only
certain aspects of the genetic characteristics of the plant, although its expected results may
be slow.
Keywords: Induction, Mutagenesis.
Ciminel, Andreyev y Chávez (2022). Obtención de mutantes con características …
[94]
INTRODUCCIÓN
El frijol común (Phaseolus vulgaris L.) es una
importante fuente de proteínas,
considerado como una legumbre esencial
de la canasta familiar en la dieta alimenticia
diaria para la población mundial
(Fernández et al., 2016). Es por su gran
importancia en la dieta a nivel mundial
(incluyendo gran parte de países
latinoamericanos), y la insuficiente cantidad
de variedades obtenidas utilizando el
método de inducción, que estimamos de
vital importancia el estudio en la obtención
de las variaciones genéticas existentes del
frejol que han sido originadas por la
recombinación de genotipos en
poblaciones, por su acción recíproca
constante con las fuerzas de la naturaleza
y no por las mutaciones espontáneas
(Salazar, 1984; Novak & Bruner, 1992).
Para desarrollar nuevas variedades de
plantas, cultivarlas y lograr el consumo
humano se utiliza la fitotecnia, la cual
combina mejores propiedades de varias
plantas en una sola. La utilización de
radiaciones gamma como una alternativa
para obtener variación genética por la vía
de mutaciones inducidas es una técnica
empleada hoy en día con bastante
frecuencia en el mejoramiento genético de
las plantas, que ha permitido la obtención
de cultivares de alta adaptación en muchas
especies, ya que puede permitir la
obtención de genotipos superiores en
corto tiempo (Novak & Brunner, 1992). No
obstante, su uso, implica estar precedida
de ensayos que permitan determinar la
dosimetría adecuada, familiarizar al
mejorador sobre el efecto que las
radiaciones tienen sobre el material vegetal
utilizado (Novak & Brunner, 1992).
La genética se ha convertido en una
ciencia básica de la fitotecnia con el
desarrollo del método de hibridación. Este
método, que a menudo se complementa
con el uso del plasma germinal obtenido
por mutación inducida, ha llegado a ser el
más empleado para la multiplicación de las
plantas por reproducción sexual (Novak &
Brunner, 1992). La inducción de mutaciones
ha resultado ser un método eficaz para
lograr variaciones dentro de un tipo de
cultivo, ya que ofrece la posibilidad de
inducir características deseadas que no se
pueden hallar en la naturaleza o se han
perdido durante el proceso evolutivo
(Novak & Brunner, 1992).
Cuando los fitogenetistas no encuentran
en el banco de genes de que disponen, un
gen, o genes, resistente a una enfermedad
en particular o tolerante a los cambios del
medio ambiente, no tienen otra opción
evidente sino tratar de inducir la mutación
(Novak & Brunner, 1992). El tratamiento
con agentes mutágenos altera los genes o
divide los cromosomas. La mutación de
genes ocurre de forma natural como un
error en la reproducción del ácido
desoxirribonucleico (ADN). Algunos de
estos tipos de error pueden subsanarse,
pero otros pueden pasar a la próxima
división de la célula y establecerse en el
retoño de la planta como mutaciones
espontáneas (Novak & Brunner, 1992).
El propósito de la presente revisión
bibliográfica fue recopilar información,
seleccionar datos específicos y mostrar el
estado actual del conocimiento de
mutantes con características importantes
en Phaseolus vulgaris L. para presentarlos a
los lectores como una síntesis.
MATERIALES Y MÉTODOS
La presente investigación correspondió al
enfoque cualitativo, de tipo documental,
Ciminel, Andreyev y Chávez (2022). Obtención de mutantes con características …
[95]
que se caracteriza por abordar problemas
teóricos y empíricos con el fin de recopilar
información, seleccionar datos específicos
y mostrar el estado actual del conocimiento
de mutantes con síntesis.
El presente estudio estuvo compuesto por
30 investigaciones en texto que tratan del
tema mutantes con características
importantes en Phaseolus vulgaris L.
(Fabaceae). Esta investigación utilizó
documentos electrónicos procedentes de
las bases de datos Scopus, Dialnet, Redalyc,
Scielo y tesis de post grado. La búsqueda
de información se realizó desde enero
hasta abril del 2021, por tres investigadores,
quienes seleccionaron los términos de
búsqueda en español y su equivalente en
inglés y portugués. Una vez definidos los
términos en español, se limitó la búsqueda
por fecha de publicación del 1980 al 2020,
considerando a las opciones de búsqueda
avanzada: “AND”, “OR” y “AND NOT”.
Los criterios de inclusión que se
consideraron en el presente estudio fueron:
• Investigaciones escritas en inglés,
español y portugués, indexados en
publicaciones científicas internacionales
disponibles en los buscadores en línea.
• Documentos electrónicos no mayores a
30 años de antigüedad de publicación.
• Documentos completos, se
consideraron tesis y artículos.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
A partir del análisis de la revisión realizada,
los principales hallazgos se enmarcan en:
1) Efecto de bajas dosis de radiación de
gamma en la germinación de semillas del
frejol común
El uso de la radiación gamma y alginato de
sodio puro e irradiado en la germinación y
crecimiento inicial de semillas de frijol
permitió analizar cómo se obtuvieron las
semillas, las cuales provinieron de un
productor de alimentos orgánicos en
Friburgo, RJ, sometidas a dosis de radiación
que varían de 0 a 150 Gy en un radiador
Gammacell Excel 220 de Nordion, equipado
con una fuente de 60 Co con una tasa de
dosis de 70 Gy/min. Después de la
germinación, las semillas se colocaron en un
sistema hidropónico, donde las plantas
crecieron y se desarrollaron en dos
semanas.
El sistema utilizado fue el cultivo en agua
con solución nutritiva donde se agregaron
los elementos necesarios para el desarrollo
de las plantas. Además de la solución
nutritiva, se probó la influencia del alginato
de sodio en el crecimiento, utilizando
soluciones al 4% con alginato puro o
alginato irradiado con concentraciones de
50 a 500 μg/g. Al final de este período, las
plantas tenían sus raíces separadas, se
midieron sus alturas y la masa verde se secó
para evaluar el peso. El análisis estadístico
de los resultados mostró que no hubo
diferencias significativas, entre los diferentes
tratamientos, en el crecimiento de la semilla
después de la germinación en los rangos de
dosis utilizados. (Martirena et al., 2019).
Sin embargo, se obtuvo una diferencia
significativa para las concentraciones de
alginato irradiado por encima de 400 μg/g,
lo que indica que parece influir en el
crecimiento de las plantas.
2) Efecto de diferentes explantes irradiados
en la regeneración in vitro de frijol común
(Phaseolus vulgaris l.) cultivar “Ica Pijao”
El mejoramiento genético convencional en
frijol común resulta difícil debido a que
presenta una base genética estrecha y muy
estable. En este sentido, la combinación de
la mutagénesis y el cultivo de tejidos es una
alternativa para inducir variabilidad genética
Ciminel, Andreyev y Chávez (2022). Obtención de mutantes con características …
[96]
en la búsqueda de tolerancia a factores
bióticos y abióticos. Para determinar el
efecto de diferentes explantes irradiados en
la regeneración in vitro de frijol común
(Phaseolus vulgaris L.). Martirena et al. (2019)
aplicaron radiaciones gamma en callos, en
el nudo cotiledonal con un cotiledón (NC-1)
con dosis de 0, 10, 20, 30, 40, 50 y 60 Gy, y
semillas con 0, 100, 200, 300 y 400 Gy.
Además, se evaluó el porcentaje de
germinación, longitud de las raíces,
porcentaje de explantes que formaron
callos, masa fresca (g) de los callos, número
de brotes por callo y el número de brotes
con raíces. La radiación gamma provocó
una disminución en la masa fresca del callo
y NC-1. Los callos y el NC-1 solamente
formaron brotes con las dosis de 10 y 20 Gy,
pero estos fueron hiperhíricos. Los
resultados demostraron que la semilla
irradiada fue el explante con el que se logró
la regeneración in vitro de plantas con hojas
definidas, por lo que se recomienda como
explante inicial para el uso combinado de
mutagénesis y regeneración in vitro de
plantas para el cultivar P. vulgaris “ICA Pijao”
a través de la organogénesis indirecta
(Martirena, et al., 2019).
3) Respuesta L. cultivar `Ica Pijao' irradiadas
con diferentes dosis de radiación gamma
La disminución de los rendimientos en frijol
común (Phaseolus vulgaris L.) a nivel
mundial, principalmente se debe a factores
abióticos; por ello, buscar variedades
tolerantes resulta esencial para los
programas de mejoramiento genético en
esta especie. El empleo de la mutagénesis
unido a la variación somaclonal, constituye
una herramienta para incrementar la
variabilidad genética en el cultivo. El objetivo
fue determinar la respuesta in vitro de
semillas de frijol común cultivar ‘Ica Pijao’
expuesto a diferentes dosis de radiación
Gamma. Las dosis estudiadas fueron: 0, 80,
90, 100, 200, 300 y 400 Gy. Se evaluó la
germinación in vitro de las semillas. En la
formación y multiplicación de callos, se
determinó la masa fresca (g) a los 21, 42 y
63 días de cultivo. Se logró el 100% de
germinación de las semillas con las dosis de
radiaciones estudiadas. Sin embargo, se
observaron afectaciones en la formación de
callos, ya que con las dosis de 300 y 400 Gy
no se logró su formación. Con 80 y 90 Gy se
alcanzaron valores superiores de masa
fresca con diferencias significativas con las
dosis de 100 y 200 Gy. La regeneración de
plantas se afectó, y se formaron pequeños
brotes con las dosis de 80, 90, 100 y 200 Gy.
Los resultados mostraron que para la
variedad ‘Ica Pijao’ dosis superiores a 90 Gy,
comprometen la formación y multiplicación
de callos, así como la regeneración de
plantas (Veitía et al., 2017).
4) Estudios sobre ontogenia y algunos
caracteres del frijol común (Phaseolus
vulgaris L.) De semillas irradiadas con
neutrones rápidos
Para investigar la ontogenia en semillas de
frijol común (Phaseolus vulgaris L.),
utilizando diferentes dosis de neutrones
rápidos como tratamientos mutagénicos, se
utilizó datos del recuento de mutaciones de
clorofila, morfología y color del hipocótilo
en progenies en la generación M
3
y tasas de
segregación heterocigotas determinadas en
progenies en la generación M
2
. El análisis
topográfico de las plantas M
1
se realizó para
localizar la posición de las mutaciones
dentro de las inflorescencias, lo que permitió
verificar la condición quimérica de las
plantas M
1
. Se realizaron estudios
adicionales determinando los parámetros:
fertilidad de las plantas M
1
, germinación de
semillas y supervivencia de las plantas M
2
,
germinación de semillas M
3
y frecuencia de
Ciminel, Andreyev y Chávez (2022). Obtención de mutantes con características …
[97]
mutaciones determinadas en la generación
M
3
(Steagall, 1982).
Los resultados mostraron que el tratamiento
con 2,0 krad de neutrones rápidos fue más
eficiente que con 1,0 krad, causando una
mayor tasa de segregación que
correspondió a una disminución en el
número de células iniciales. El análisis
topográfico de las plantas M
1
mostró que el
mismo tipo de mutación apareció en varias
ramas primarias de una planta, y que más
de un tipo de mutación ocurrió en la misma
rama primaria. Esto sugirió que más de una
célula inicial está involucrada en la
formación de una rama primaria y que todas
las ramas primarias de una planta se
originan a partir de las mismas células
iniciales. Teniendo en cuenta que las
mutaciones aparecen al azar y, cuando se
determinan por métodos convencionales,
presentan baja frecuencia, los resultados
obtenidos en este trabajo mostraron la
aparición de un número relativamente alto
de mutaciones por célula (Steagall, 1982).
5) Inducción de mutaciones para mayor
altura basal en frijol común usando rayos
gamma
Para la inducción de mutantes con mayor
altura basal (suma de la altura del hipocótilo
y epicotilo), las semillas de frijol (Phaseolus
vulgaris L.) se irradiaron con rayos gamma.
Se obtuvo un mutante que tenía una altura
basal 1,7 veces mayor que el control en la
generación M
2
, del tratamiento con 24 krad.
La mutación fue monogénica debido a un
alelo recesivo. Es el primer mutante
obtenido por inducción de mutación,
por esta característica (Tulmann et al., 1994).
6) Resistencia o tolerancia al virus del
mosaico dorado de la planta de frijol
(Phaseolus vulgaris L.), obtenida por
inducción de mutaciones
Los experimentos se llevaron a cabo con el
objetivo de seleccionar, evaluar y utilizar
mutantes inducidos de Phaseolus vulgaris L.
resistentes o tolerantes al mosaico dorado,
una enfermedad viral del frijol. Las semillas
de tres cultivares de frijoles se trataron con
rayos gamma o con el químico mutágeno
etil metano sulfonato (EMS). Después de la
inoculación de mosaico dorado de 50,000
M
2
las plántulas, en un insectario, se realizó
la selección y se seleccionó un mutante
tolerante (TMD-1). La evaluación de TMD-1
se realizó comparándola con el cultivar
progenitor Carioca, lo que indica que,
aunque mostró una productividad menor
que el material original, (lo que evitó que se
usara directamente sobre una base
comercial), mantuvo la misma reacción al
óxido, tizón bacteriano y mosaico común.
También se realizaron estudios sobre la
base genética de la mutación. La posibilidad
de utilizar este mutante en un programa de
fitomejoramiento destinado a obtener
resistencia al mosaico dorado se demostró
en cruces entre TMD-1 y dos cultivares, a los
que era posible la transferencia de
tolerancia (Tulmann, et al.,1979).
7) Evaluación de materiales criollos y
mejorados de frijol (Phaseolus vulgaris L.),
irradiados con rayos gamma en la búsqueda
de tolerancia a la sequía, San Andrés,
municipio de Ciudad Arce, La Libertad
Se investigaron 4 genotipos de frijol
irradiados en su segunda generación (M
2
) y
sus testigos en el período de marzo a junio
de 2013 en la Estación San Andrés 1 del
Centro Nacional de Tecnología
Agropecuaria y Forestal "Enrique Álvarez
Córdova" (CENTA), ubicado en el municipio
de Ciudad Arce, Departamento de La
Libertad; con el propósito de seleccionar
plantas con características cualitativas y
cuantitativas relacionadas con la tolerancia
de sequía. Para ello, se suspendió el riego a
Ciminel, Andreyev y Chávez (2022). Obtención de mutantes con características …
[98]
partir de la floración hasta la cosecha. El
factor del estudio fueron los genotipos
irradiados y sus testigos, quedando estos de
la siguiente manera: Rojo de seda testigo
(RS), Rojo de seda irradiado (RSM), Vaina
blanca testigo (VB), Vaina blanca irradiado
(VBM), Ferromás testigo (FE), Ferromás
irradiado (FEM), Chaparrastique testigo
(CH), y Chaparrastique irradiado (CHM); se
sembraron bajo un diseño de bloques
completos al azar, midiéndose en ellos las
variables cualitativas más importantes como
el color de hipocótilo, color de la flor, color
de vaina madura, color y forma de la semilla;
y entre las cuantitativas días a emergencia,
porcentaje de plantas fuera de tipo, días a
floración, días a madurez fisiológica,
número de semillas por vaina, peso de 100
semillas, días a cosecha y rendimiento.
Para el análisis de los resultados, se
aplicaron métodos descriptivos
multivariados, como el análisis de
correspondencia simple y métodos
inferenciales, como el Diseño de Bloques
Completos al Azar, con prueba de
Diferencia Mínima Significativa (DMS),
apoyándose del programa estadístico IBM
SPSS Statistic versión 21, con una
probabilidad P≤0,05. Presentaron mayor
diferencia los materiales irradiados con
respecto a sus testigos, para las variables
cualitativas: color de cotiledón y epicotilo
(Rojo de Seda y Ferromás), color de cáliz y
cuello del estambre (Rojo de Seda), color de
vaina madura y forma de la semilla para
(Vaina Blanca y Ferromás), color primario de
la semilla (Ferromás y Chaparrastique);
mientras que para las variables cuantitativas,
los genotipos irradiados que presentaron los
mejores efectos fueron Rojo de Seda y
Chaparrastique; para el porcentaje de
plantas fuera de tipo, días a floración, días a
maduración, peso de 100 semillas y
rendimiento por unidad de área Vaina
Blanca y número de semillas por vaina
Chaparrastique (Alvarado et al., 2014).
8) Concentración óptima de Metano
Sulfonato de Etilo en Phaseolus vulgaris L.
cv. ‘DOR 364’ para inducir variaciones
fenotípicas
El frijol común (Phaseolus vulgaris L.) es la
principal leguminosa utilizada para la
alimentación humana a nivel mundial, por lo
que es un objetivo importante en los
programas de mejoramiento genético para
favorecer determinados caracteres de
interés agronómico. Con el propósito de
determinar la concentración óptima de
metano sulfonato de etilo, para inducir
variaciones fenotípicas en Phaseolus vulgaris
L. cv. ‘DOR 364’ se realizó este trabajo. Las
semillas se trataron con diferentes
concentraciones de metano sulfonato de
etilo (0, 20, 30, 40, 50, 60 mM) y se
sembraron en bolsas de polietileno que
contenían 4 kg de sustrato. Las evaluaciones
se realizaron en variables involucradas en la
germinación, crecimiento, desarrollo foliar,
morfología de las plantas, así como
componentes del rendimiento. El metano
sulfonato de etilo influyó sobre las diferentes
etapas de desarrollo del cultivo que fueron
analizadas. Basados en la germinación y
desarrollo de las plantas, la supervivencia,
los componentes del rendimiento y la
frecuencia de variaciones fenotípicas se
seleccionó 30 mM de metano sulfonato de
etilo como la concentración óptima para
establecer una población de posibles
mutantes en frijol común cv. ‘DOR 364’.
Hasta la fecha no se han informado estudios
previos al respecto. Con la concentración
óptima se logró generar el mayor número
de variaciones fenotípicas en la población
analizada (Rojas et al., 2016).
Ciminel, Andreyev y Chávez (2022). Obtención de mutantes con características …
[99]
9) Identificación de nuevos SNP
asociados con la tolerancia a la sequía en
frijol común (Phaseolus vulgaris L.)
Frijol común (Phaseolus vulgaris L.) es una
leguminosa de alta demanda de nutrición
humana y un producto agrícola muy
importante. La producción de frijol común
está limitada por tensiones ambientales
como la sequía. Aunque la selección de
plantas convencionales se ha utilizado para
aumentar el rendimiento de producción y la
tolerancia al estrés, la selección de tolerancia
a la sequía basada en el fenotipo se
complica por los cambios fisiológicos,
anatómicos, celulares, bioquímicos y
moleculares asociados. Estos cambios están
modulados por la expresión diferencial de
genes. Un método común para identificar
genes asociados con fenotipos de interés es
la caracterización de polimorfes de
nucleótido único (SNP) para vincularlos con
funciones específicas.
En este trabajo, se seleccionaron dos líneas
parentales tolerantes a la sequía de
Mesoamérica, Pinto Villa y Pinto Saltillo. Las
líneas parentales se utilizaron para generar
una población de 282 familias (F3: 5) y se
caracteriza por 169 SNP. Asociamos la
segregación de los marcadores moleculares
en nuestra población con fenotipos que
incluyen tiempo de floración, madurez
fisiológica, período reproductivo, planta,
semilla y biomasa total, índice de
reutilización, rendimiento de semilla, peso
de 100 semillas e índice de cosecha en tres
ciclos de cultivo. Observamos 83 SNP con
asociación significativa (p≤0,0003 después
de la corrección de Bonferroni) con nuestros
fenotipos cuantificados. Los fenotipos más
asociados fueron días de floración y
biomasa de semillas con 58 y 44 SNP
asociados, respectivamente. Treinta y siete
de los 83 SNP se anotaron en un gen con
una función potencial relacionada con la
tolerancia a la sequía o funciones
moleculares/bioquímicas relevantes.
Algunos SNP como SNP28 y SNP128 están
relacionados con la biosíntesis de almidón,
un protector osmótico común; y SNP18 está
relacionado con la biosíntesis de prolina,
otro protector osmótico bien conocido
(Villordo-Pineda et al., 2015).
10) Selección en poblaciones mutantes
de frijol (Phaseolus vulgaris L.) para rasgos
adaptativos
La existencia de variabilidad es fundamental
para el éxito de la mejora. Los cultivares
comerciales de frijol tienen poca variabilidad
para los rasgos adaptativos. El uso de
agentes mutagénicos puede aumentar la
frecuencia de mutación, lo que permite el
desarrollo de variaciones para las
características de interés. Por lo tanto,
cuatro genotipos de frijol fueron sometidos
a rayos gamma de 60Co, a dosis de 0, 100,
200 y 400 Gy, en 2006/07. En la siguiente
cosecha (2007/08) las poblaciones mutantes
sometidas a dosis de 0, 100 y 200 Gy, se
cultivaron en un diseño de bloque ampliado.
La evaluación de familias mutantes y no
mutantes reveló diferencias fenotípicas
significativas. Al estimar la distancia de
Mahalanobis (D2) fue posible formar cuatro
grupos (Rocha et al., 2009).
11) Estudio del efecto de la irradiación
(60Co) en M
1
plantas de frijol común
(Phaseolus vulgaris L.) cultivares y
determinación de las dosis adecuadas para
el mejoramiento por mutación
El objetivo de este estudio es determinar los
cambios morfológicos y la dosis adecuada
de irradiación gamma para el programa de
mejoramiento por mutación de frijol común
(Phaseolus vulgaris L.). Los efectos de
diferentes dosis (100, 150, 200, 250, 300, 350,
400, 450 y 500 Gy) de irradiación gamma
Ciminel, Andreyev y Chávez (2022). Obtención de mutantes con características …
[100]
(60Co) sobre los parámetros de crecimiento
de las plántulas y las tasas de supervivencia
de las plantas se investigaron. Para
determinar la dosis adecuada y los cambios
morfológicos; longitud del brote, longitud
de la raíz, peso fresco del brote, peso seco
del brote, peso fresco de la raíz, peso seco
de la raíz, diámetro del tallo, ancho de la
hoja, longitud de la hoja, clorofila. Se
evaluaron las plantas. Se ha determinado
que las dosis de gamma y las variedades
utilizadas son significativas en cuanto al
número de plantas supervivientes y los
parámetros de crecimiento de las plantas. Se
determinó que la irradiación gamma de
dosis bajas afectaba de manera estimulante
el peso fresco de los brotes, el peso seco de
los brotes, el peso seco de las raíces y el
peso fresco de las raíces. Se obtuvo una
correlación negativa entre todos los rasgos
de crecimiento de las plantas y el diámetro
del tallo, y los diámetros del tallo están
engrosados debido al aumento de las dosis
gamma. Las aplicaciones de rayos gamma
se efectuaron sobre la tasa de supervivencia
de la planta considerablemente más que el
porcentaje de germinación. La dosis
adecuada aplicable de Efsane se determinó
en 318,22 Gy, mientras que la dosis
apropiada de F16 se determinó en 303,17 Gy
(Kamile Ulukapia y Süleyman Fatih Ozmenb,
1997).
12) Actividades de la clorofilasa y
degradación de la clorofila durante la
senescencia de la hoja en mutantes no
amarillentos y de tipo salvaje de Phaseolus
vulgaris L.
Las actividades de clorofilasa, contenido de
pigmentos que incluyen clorofila a y b,
clorofilida un y b, y phaeophorbide A
Durante la senescencia de las hojas bajo
baja de oxígeno (0,5% O
2
) y el control (aire)
se investigaron en un no amarillea mutante
y de tipo salvaje tipo hojas de judías verdes
(Phaseolus vulgaris L.). La clorofillasa de los
tejidos de las hojas tuvo una actividad
máxima cuando se incubó a 40 ° C en una
mezcla que contenía 50% de acetona. Tanto
en las mutantes como en las de tipo salvaje,
la actividad de la clorofilasa fue la más alta
en las hojas no senescentes recién
cosechadas y disminuyó drásticamente en el
transcurso de la senescencia, lo que indica
que la pérdida de clorofilas en las hojas
senescentes no está directamente
relacionada con la actividad de la clorofilasa
y esa actividad no se altera en el mutante. El
tipo salvaje tenía proporciones más altas de
clorofila a a clorofila b que el mutante y las
proporciones de clorofila a: b aumentaron
durante la senescencia en ambos tipos. En
las hojas senescentes mutantes,
acumulaciones de clorofilida una y
clorofilida b se detectaron, pero no se
encontró feofórbido a. El clorofiluro b tuvo
una mayor acumulación que el clorofiluro a
en la etapa temprana de senescencia.
Tratamiento de bajo oxígeno no sólo retrasa
la degradación de la clorofila, pero también
mejoró las acumulaciones de clorofilida un y
b y bajó las proporciones de clorofila una a
la clorofila b. (Colmillo de Zhengyi et al.,
1998).
13) Una mutación en la vía de biosíntesis
del ácido indol-3-acético de Pseudomonas
syringae pv. syringae afecta el crecimiento
de Phaseolus vulgaris y la producción de
siringomicina
Homólogos de los genes para la biosíntesis
del ácido indol-3-acético (IAA) de
Pseudomonas syringae pv. savastanoi se
recuperaron de una biblioteca genómica de
P. syringae pv. syringae, y se determinaron
sus secuencias de nucleótidos. Relación de
secuencia entre P. syringae pv. syringae y P.
syringae pv. savastanoi iaa operons es
Ciminel, Andreyev y Chávez (2022). Obtención de mutantes con características …
[101]
superior al 90% dentro de los loci iaaM e
iaaH pero declina drásticamente en una
posición de aproximadamente 200 pb 5 'del
codón de iniciación de la traducción iaaM.
Se detectó un tercer marco de lectura
abierto aguas abajo de iaaH. La producción
de IAA fue indetectable en la cepa mutante
Y30-53.29, que se generó por transposición
de Tn5 en el gen iaaM de P. syringae pv.
syringae Y30. El mutante deficiente en IAA
(IAA-) retuvo la capacidad de colonizar el
filoplano del frijol e indujo síntomas de
enfermedad en el frijol que eran similares a
los producidos por la cepa parental.
Sin embargo, la dinámica de la población de
la cepa IAA- durante la fase parasitaria en
las hojas difirió de las de la cepa parental y
del mutante genéticamente restaurado para
la biosíntesis de IAA. El mutante fue capaz
de inducir síntomas de enfermedad cuando
se estableció en tejidos de frijol a una
densidad celular inicial más baja que
cualquier